基因工程实验

　　前言
　　实验1 基因组DNA的提取
　　实验1.1 植物基因组DNA的提取
　　实验1.2 动物基因组DNA的提取
　　实验1.3 细菌基因组DNA的提取
　　实验1.4 酵母菌基因组DNA的提取
　　实验2 总RNA和mRNA的提取
　　实验2.1 Trizol法提取总RNA
　　实验2.2 异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA
　　实验2.3 总RNA提取试剂盒
　　实验2.4 mRNA的分离纯化
　　实验3 质粒DNA的提取
　　实验3.1 碱裂解法少量提取质粒DNA
　　实验3.2 少量质粒提取试剂盒
　　实验4 目的基因的获得
　　实验4.1 PCR扩增
　　实验4.2 反转录PCR
　　实验5 限制性内切酶的酶切反应
　　实验5.1 pUC18/19质粒DNA的EcoRI单酶解
　　实验5.2 HindⅢ和Sal I对pUC18/19质粒DNA的双酶切
　　……
　　实验6 凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化
　　实验7 DNA片段的体外连接
　　实验8 大肠杆菌感受态细胞的制备
　　实验9 重组子的转化
　　实验10 菌落PCR筛选阳性重组子
　　实验11 重组质粒的酶切鉴定
　　实验12 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
　　实验13 基因表达产物的检测分析:SDS-PAGE
　　实验14 Western Blotting（蛋白免疫印记）实验
　　实验15 Southern印迹实验
　　实验16 全长cDNA文库的构建
　　实验17 凝胶阻滞实验
　　实验18 染色质免疫共沉淀技术
　　参考文献
　　附录一 基因工程实验中的常用数据和换算关系
　　附录二 基因工程实验常用试剂、溶液和缓冲液
　　附录三 PCR实验引物设计原则

　　    本书包括18个实验，分别是基因组DNA的提取、总RNA和mRNA的提取、质粒DNA的提取、目的基因的获得、限制性内切酶的酶切反应、凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化、DNA片段的体外连接、大肠杆菌感受态细胞的制备、重组子的转化、菌落PCR筛选阳性重组子、重组质粒的酶切鉴定、外源基因在大肠杆菌中的诱导表达、基因表达产物的检测分析、WesternBlotting实验、Southern印迹实验、全长cDNA文库的构建、凝胶阻滞实验和染色质免疫共沉淀技术。
　　    本书内容清晰准确、简明扼要，便于指导操作。可作为综合性大学、师范和农林院校生物工程、生物技术、生物制药等专业基因工程实验指导用书。