生物化学实验（第五版）

　　目录第五版前言第四版前言第一章 糖类 1实验1 糖的颜色反应 1实验1.1 莫氏实验 1实验1.2 塞氏实验 2实验1.3 杜氏实验 3实验2 糖的还原作用 4实验3 血糖的定量测定（Folin-Wu法） 5实验4 血糖的定量测定（Folin-Malmros法） 7实验5 血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法） 9实验6 血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法） 11实验7 葡萄糖含量测定（苯酚法） 13实验8 蒽酮比色定糖法 14实验9 植物组织中可溶性总糖的测定（蒽酮比色法） 16实验10 总糖和还原糖的测定（3，5-二硝基水杨酸法） 18实验11 多糖的实验 20实验12 果胶的提取与果胶含量的测定 21实验13 肝素钠的定量测定 24实验14 糖的旋光性和变旋现象 26第二章 脂质 28实验15 脂肪的组成 28实验16 卵磷脂的提取和鉴定 30实验17 粗脂肪含量的测定（Soxhlet抽提法） 30实验18 碘价的测定（Hanus法） 33实验19 皂化…
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　　《生物化学实验（第五版）》在第四版多年使用的基础上进行了全面修订。《生物化学实验（第五版）》共100多个实验，内容设置与陈钧辉教授等编著的《普通生物化学》第五版教材一致，包括糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素、激素、物质代谢与生物氧化，以及为培养学生应用能力和创新能力的综合实验，非常适合作为本科教学的同步教材。为进一步拓宽学生的知识面，我们将与《生物化学实验（第五版）》配套的一些生物化学仪器分析的内容放在科学出版社教学服务网站上，网站上还有16个生物化学实验操作流程的视频，供学生观看。

　　目录第五版前言第四版前言第一章 糖类 1实验1 糖的颜色反应 1实验1.1 莫氏实验 1实验1.2 塞氏实验 2实验1.3 杜氏实验 3实验2 糖的还原作用 4实验3 血糖的定量测定（Folin-Wu法） 5实验4 血糖的定量测定（Folin-Malmros法） 7实验5 血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法） 9实验6 血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法） 11实验7 葡萄糖含量测定（苯酚法） 13实验8 蒽酮比色定糖法 14实验9 植物组织中可溶性总糖的测定（蒽酮比色法） 16实验10 总糖和还原糖的测定（3，5-二硝基水杨酸法） 18实验11 多糖的实验 20实验12 果胶的提取与果胶含量的测定 21实验13 肝素钠的定量测定 24实验14 糖的旋光性和变旋现象 26第二章 脂质 28实验15 脂肪的组成 28实验16 卵磷脂的提取和鉴定 30实验17 粗脂肪含量的测定（Soxhlet抽提法） 30实验18 碘价的测定（Hanus法） 33实验19 皂化价的测定 35实验20 脂肪酸价的测定 37实验21 脂肪乙酰价的测定 38实验22 血清胆固醇的定量测定（磷硫铁法） 39实验23 血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法） 41实验24 血清胆固醇的定量测定（醋酸酐法） 42实验25 血清甘油三酯简易测定法 44实验26 血清甘油三酯的测定（GPO-PAP法） 46实验27 丙二醛（MDA）的测定 48第三章 蛋白质 51实验28 蛋白质的颜色反应 51实验29 蛋白质的沉淀反应 54实验30 蛋白质浓度测定（微量凯氏定氮法） 55实验31 蛋白质浓度测定（双缩脲法） 58实验32 蛋白质浓度测定（Folin-酚试剂法） 60实验33 蛋白质浓度测定（紫外光吸收法） 61实验34 蛋白质浓度测定（考马斯亮蓝结合法） 63实验35 非蛋白氮（NPN）的测定 64实验36 甲醛滴定法 66实验37 DNP 氨基酸的制备和鉴定 68实验38 DNS 氨基酸的制备和鉴定 71实验39 用DNS法鉴定蛋白质或多肽的N 端氨基酸 73实验40 用DNS法测定多肽的氨基酸组成 76实验41 肽的序列分析（PTH 法） 77实验42 甲硫氨酰甘氨酸二肽的合成 80实验43 尿素对蛋白质的变性作用 82实验44 氨基酸纸层析法 84实验45 氨基酸微晶纤维素薄板层析法 87实验46 离子交换柱层析法分离氨基酸 88实验47 血清白蛋白的分离与纯化 90实验48 凝胶层析法分离纯化蛋白质 93实验49 DEAE-SephadexA-25分离纯化多肽 95实验50 亲和层析法分离纯化单克隆抗体 97实验51 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 98实验52 血清糖蛋白醋酸纤维薄膜电泳 101实验53 牛乳中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定 103实验54 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离血清蛋白质 105实验55 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定胰岛素 108实验56 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量 110实验57 用等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点 114实验58 对流免疫电泳法测定胎儿甲种蛋白质 116实验59 火箭免疫电泳法 118实验60 Western印迹 119实验61 酶联免疫吸附测定（ELISA） 121第四章 核酸 124实验62 核酸的定量测定（定磷法） 124实验63 酵母RNA的提取 126实验64 RNA的定量测定（苔黑酚法） 127实验65 动物肝脏中DNA的提取 129实验66 DNA的定量测定（二苯胺法） 130实验67 5′核苷酸的定量测定（过碘酸氧化法） 132实验68 DEAE 纤维素薄板层析法测定核苷酸 134实验69 腺苷三磷酸的定量测定（纸电泳法） 136实验70 核酸的酶法降解以及葡聚糖凝胶层析法制备5′单核苷酸 138实验71 质粒DNA的提取 139实验72 DNA琼脂糖凝胶电泳 141第五章 酶 144实验73 影响酶促反应的因素——温度、pH、激活剂及抑制剂 144实验74 胰蛋白酶米氏常数的测定 147实验75 胆碱酯酶米氏常数的测定 150实验76 过氧化氢酶米氏常数的测定 152实验77 用正交法测定几种因素对酶活力的影响 153实验78 胰蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氯对胰蛋白酶的抑制作用 156实验79 溶菌酶的提纯结晶和活力测定 159实验80 猪胰糜蛋白酶的制备和纯度鉴定 161实验81 大肠杆菌碱性磷酸酶的制备 163实验82 碱性磷酸酶的提取和分离及比活力测定 166实验83 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶 170实验84 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶 172实验85 肝脏谷丙转氨酶活力测定 174实验86 血清谷丙转氨酶活力测定 177实验87 固定化5′-磷酸二酯酶的制备及其在分离核苷酸中的应用 178第六章 维生素 184实验88 维生素A的定性测定 184实验89 维生素B1 的定性测定 185实验90 维生素C的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法） 186实验91 维生素C的定量测定（磷钼酸法） 188实验92 核黄素（维生素B2）荧光光度定量测定法 190实验93 胡萝卜素的定量测定 192实验94 荧光法测定核黄素结合蛋白核黄素的解离常数 194第七章 激素 197实验95 尿中17-羟皮质类固醇的测定（Porter-Silber法） 197第八章 物质代谢与生物氧化 200实验96 肌糖原的酵解作用 200实验97 脂肪酸的β-氧化 202实验98 华氏（Warburg）呼吸仪瓶常数的测定 204实验99 L-谷氨酸的酶促脱羧作用（测压法测定L-谷氨酸） 206实验100 发酵过程中无机磷的被利用和ATP的生成（ATP的生物合成） 208第九章 综合实验 211实验101 用高效液相层析（HPLC）定量测定胰岛素中的氨基酸 211实验101.1 胰岛素的酸水解 211实验101.2 用HPLC定量测定胰岛素水解产物中的氨基酸 212实验102 维生素C对过氧化氢（H2O2）诱导的小鼠巨噬细胞氧化损伤的保护作用 214实验102.1 小鼠腹腔巨噬细胞的收集与培养 214实验102.2 MTT法测定巨噬细胞死亡率 216实验102.3 活性氧检测试剂盒探测细胞内活性氧的水平 217实验102.4 NO和NO合成酶活性的测定 219实验103 酵母醇脱氢酶的提纯及其性质的研究 220实验103.1 酵母醇脱氢酶的提纯 220实验103.2 酵母醇脱氢酶的凝胶层析 223实验103.3 酵母醇脱氢酶的专一性 224实验103.4 酵母醇脱氢酶的动力学研究 226实验104 α-淀粉酶的分离纯化、鉴定和Km、Vmax的测定 231实验104.1 α-淀粉酶的活力测定 232实验104.2 α-淀粉酶的疏水层析 234实验104.3 α-淀粉酶的离子交换柱层析 236实验104.4 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定α-淀粉酶 238实验104.5 米氏常数（Km）和最大反应速度（Vmax）的测定 240实验105 螺旋藻藻蓝蛋白的分离、纯化与鉴定 242实验105.1 螺旋藻粗藻蓝蛋白的制备 242实验105.2 离子交换柱层析法分离藻蓝蛋白 243实验106 原花色素的提取、纯化与测定 244实验106.1 山楂原花色素的提取 245实验106.2 原花色素的测定（Ⅰ） 246实验106.3 原花色素的测定（Ⅱ） 248实验107 熊果酸的制备和测定 249实验107.1 山楂熊果酸的制备 249实验107.2 熊果酸含量测定 250实验108 镍化合物诱导人Jurkat细胞凋亡途径的研究 252实验108.1 Jurkat细胞的培养 252实验108.2 AnnexinVGFITC/PI双染法检测细胞凋亡 253实验108.3 RTGPCR检测凋亡相关基因bcl-2 的表达 255实验108.4 酶联免疫吸附检测Bcl-2蛋白表达水平 257第十章 临床生化指标的自动测定（见科学出版社教学服务网站） 260附录 261一、生物化学实验须知 261二、玻璃仪器的洗涤及一些常用的洗涤剂 262三、移液器的使用 263四、吸管的使用 265五、过滤和离心 265六、930型荧光光度计的使用 266七、UV2600紫外可见分光光度计的使用 268八、自动生化分析仪（见科学出版社教学服务网站） 271九、全自动免疫分析仪TOSOH AIA2000标准化操作规程（见科学出版社教学服务网站） 271十、血红蛋白检测仪BioGRadDG10标准化操作规程（见科学出版社教学服务网站） 271十一、实验室常用酸碱的相对密度和浓度 271十二、常用酸碱指示剂 271十三、缓冲液的配制 272十四、恒沸盐酸的制备 278十五、大肠杆菌丙酮粉的制备 278十六、生物化学中某些重要化合物的Mr及pK 值 279十七、氨基酸的一些物理常数 281十八、某些蛋白质的物理性质 283十九、化学元素的相对原子质量表 284二十、离心机转速（r/min）与相对离心力（RCF）的换算 285二十一、硫酸铵饱和度的常用表 287二十二、常用离子交换剂 288二十三、常用凝胶过滤层析介质 291二十四、汞的密度 293
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　　《生物化学实验（第五版）》在第四版多年使用的基础上进行了全面修订。《生物化学实验（第五版）》共100多个实验，内容设置与陈钧辉教授等编著的《普通生物化学》第五版教材一致，包括糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素、激素、物质代谢与生物氧化，以及为培养学生应用能力和创新能力的综合实验，非常适合作为本科教学的同步教材。为进一步拓宽学生的知识面，我们将与《生物化学实验（第五版）》配套的一些生物化学仪器分析的内容放在科学出版社教学服务网站上，网站上还有16个生物化学实验操作流程的视频，供学生观看。