流式细胞术：原理、操作及应用（第二版）

　　序
　　前言 v
　　1  概述 1
　　1.1  流式细胞术基本概念 2
　　1.2  分析型流式细胞仪介绍 5
　　1.3  分选型流式细胞仪介绍 9
　　参考文献 13
　　2  流式细胞仪的原理 14
　　2.1  液流系统 15
　　2.2  光路系统 18
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　　《流式细胞术——原理、操作及应用（第二版）》主要介绍流式细胞术的原理、操作及应用，分为概述、流式细胞仪的原理、流式图、流式细胞术的基本操作与技巧、流式分析术的应用和流式分选术的应用6个部分。概述部分介绍基本概念和几款常见的流式细胞仪；原理部分具体介绍流式细胞仪的液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统；流式图部分主要介绍了流式通道、流式直方图、流式散点图和流式等高线图；操作部分介绍了样品制备、荧光素偶联抗体及标记、光电倍增管电压设定、对照设置、补偿调节、阈值设定、死细胞问题处理、分选模式选择、上样速度控制、分选设门原则、分选基本步骤等内容；流式分析术的应用部分具体介绍了流式细胞术在免疫学方面的应用，并且扩展到基础医学和生物学方面的应用；流式分选术的应用部分阐述了不同条件下流式分选的策略选择和注意事项，同时还介绍了各种干细胞包括肿瘤干细胞等的流式分选方法。

　　序
　　前言 v
　　1  概述 1
　　1.1  流式细胞术基本概念 2
　　1.2  分析型流式细胞仪介绍 5
　　1.3  分选型流式细胞仪介绍 9
　　参考文献 13
　　2  流式细胞仪的原理 14
　　2.1  液流系统 15
　　2.2  光路系统 18
　　2.3  检测分析系统 28
　　2.4  分选系统 31
　　参考文献 36
　　3  流式图 37
　　3.1  流式通道 38
　　3.2  流式直方图 39
　　3.3  流式散点图 42
　　3.4  流式等高线图 45
　　参考文献 46
　　4  流式细胞术的基本操作与技巧 48
　　4.1  样品制备 49
　　4.1.1  独立细胞样品制备 49
　　4.1.2  免疫器官样品制备 51
　　4.1.3  实体脏器样品制备 52
　　4.2  荧光素偶联抗体及其标记方法 53
　　4.2.1  荧光素 53
　　4.2.2  荧光素偶联抗体 57
　　4.2.3  样品封闭 58
　　4.2.4  荧光素偶联抗体标记 60
　　4.3  光电倍增管电压设定 62
　　4.4  对照的设置 65
　　4.4.1  阴性对照的设置 65
　　4.4.2  FMO对照 68
　　4.4.3  阳性对照的设置 68
　　4.5  补偿调节 69
　　4.5.1  补偿调节的原理 69
　　4.5.2  调节补偿的具体方法 71
　　4.5.3  三色和四色分析补偿调节方法 74
　　4.5.4  影响补偿大小的因素 76
　　4.6  阈值设定 78
　　4.7  流式分析中的死细胞问题 79
　　4.7.1  减少样品中死细胞比例的方法 79
　　4.7.2  流式分析时区分死细胞和活细胞的方法 80
　　4.8  流式分选模式选择 85
　　4.8.1  纯化模式 86
　　4.8.2  富集模式 87
　　4.8.3  单细胞模式 87
　　4.9  上样速度控制 88
　　4.9.1  流式分析速度控制 89
　　4.9.2  流式分选速度控制 89
　　4.10  分选设门基本原则 91
　　4.11  流式分选基本步骤 93
　　参考文献 94
　　5  流式分析术的应用 96
　　5.1  细胞群比例测定 97
　　5.2  表型测定 101
　　5.3  流式检测细胞因子 106
　　5.3.1  胞内染色法检测细胞因子 107
　　5.3.2  胞内染色法与ELISA法比较 112
　　5.3.3  CBA法测定细胞因子 114
　　5.3.4  CBA法与ELISA法比较 116
　　5.4  检测细胞增殖 117
　　5.4.1  相对计数法 118
　　5.4.2  示踪染料标记法 122
　　5.4.3  Brdu标记法 127
　　5.4.4  其他方法 129
　　5.5  检测细胞凋亡 130
　　5.5.1  Annexin Ⅴ/PI双染色法 131
　　5.5.2  SYTO/PI双染色法 133
　　5.5.3  细胞DNA含量分析法检测细胞凋亡 134
　　5.5.4  线粒体损伤检测法 135
　　5.5.5  活化的caspase-3检测法 139
　　5.5.6  荧光素偶联的caspase抑制剂(FLICA)标记法 139
　　5.5.7  甲酰胺诱导ssDNA单抗检测法 140
　　5.5.8  TUNEL法 141
　　5.6  检测细胞周期 142
　　5.6.1  非特异性核酸荧光染料标记法 142
　　5.6.2  特异性细胞周期调节蛋白检测法
^ 收 起　　

　　《流式细胞术——原理、操作及应用（第二版）》主要介绍流式细胞术的原理、操作及应用，分为概述、流式细胞仪的原理、流式图、流式细胞术的基本操作与技巧、流式分析术的应用和流式分选术的应用6个部分。概述部分介绍基本概念和几款常见的流式细胞仪；原理部分具体介绍流式细胞仪的液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统；流式图部分主要介绍了流式通道、流式直方图、流式散点图和流式等高线图；操作部分介绍了样品制备、荧光素偶联抗体及标记、光电倍增管电压设定、对照设置、补偿调节、阈值设定、死细胞问题处理、分选模式选择、上样速度控制、分选设门原则、分选基本步骤等内容；流式分析术的应用部分具体介绍了流式细胞术在免疫学方面的应用，并且扩展到基础医学和生物学方面的应用；流式分选术的应用部分阐述了不同条件下流式分选的策略选择和注意事项，同时还介绍了各种干细胞包括肿瘤干细胞等的流式分选方法。